LyoDt® Reagent تشخیص PCR در زمان واقعی برای ویبریو کولرا O1/O139 - بدون نیاز به زنجیره سرد و آزمایش یکبار قبل از توزیع

LyoDt^®PCR در زمان واقعی خشک شده با یخ واکنشگر تشخیصی برای ویبریو کلراO1/O139

استفاده️کتابچه راهنما

1.توضیحات

ویبریو کلرایک باکتری گرام منفی است که باعث بیماری کلرا می شود، یک بیماری عفونی حاد روده ای که با شروع سریع، انتقال بالا و مرگ و میر قابل توجهی مشخص می شود.به عنوان یک بیماری قرنطینه تحت مقررات بهداشت بین المللی، عمدتا شامل گروه های سرونی O1 و O139 است. 

این محصول یک واکنش PCR در زمان واقعی استبرای تشخیصویبریو کلراO1/O139. از مواد بسیار سالم استفاده می کنه rfb ژنویبریو کلراO1/O139 به عنوان هدف شناسایی. این یک مخلوط اصلی است که حاوی تمام مواد ضروری است، به جز DNA قالب، و به عنوان یک آزمایش در لوله های PCR برای استفاده آسان از قبل توزیع می شود.این محصول برای حمل و نقل و ذخیره سازی نیازی به زنجیره سرد ندارد.، که به طور قابل توجهی هزینه حمل و نقل را کاهش می دهد و از دست دادن احتمالی ناشی از هدر رفتن واکنشگر و آلودگی اسپری را از بین می برد.

2مشخصات و ترکیب

3. انبار و مدت عمر

ذخیره کنیددر دمای محیط (5 تا 30)°C). تا 12 ماه ثبات داره. پس از باز کردن بسته های خلاء، لطفا محصولات استفاده نشده را در کیسه پلاستیکی دوباره بسته بندی شده با مواد خشک کننده ذخیره کنید.ودر کیسه ورق آلومینیومی 

احتیاط: 

کوچک شدن گلوله واکنشگر نشان دهنده نفوذ رطوبت به لوله و رطوبت واکنشگر است.هر گونه واکنشگر با اندازه گلوله ای بسیار کوچکتر از حد معمول باید قبل از استفاده از آن دور ریخته شود یا با کنترل مثبت آزمایش شود. برای آزمایش نمونه.

4تجهیزات اضافی و عوامل مورد نیاز

1)ابزار PCR در زمان واقعی

2)پیپاستو اقلام

3)نوکلئاز-آب آزاد

4)کیت استخراج اسید نوکلئیک

5. سیستم های PCR در زمان واقعی سازگار

ABI 7500/Fast، Roche LightCycler 480II، BioRad CFX96، Bioer LineGene 9600.

6نمونه های قابل قبول

شوراب غنی سازی مواد غذایی, و غیره

7روش عمل

1)هسته ایACIDEخروجی

عصارهDNAاز نمونه ها با استفاده از یک کیت استخراج مناسب.توصیه می شود کهDNAتقریباً با 100μl از آب پاشی الوشن است.(TE یاH بدون نوکلئاز₂اوه)در مرحله آخراستخراج.اسید نوکلئیک تصفیه شده باید بلافاصله استفاده شود یا در -20°C نگهداری شود.

2)آماده سازی کنترل مثبت

کنترل مثبت می تواند در دمای محیط قبل از هیدراتاسیون نگهداری شود. تا 12 ماه.اونباید قبل از استفاده دوباره هیدراته شود.با اضافه کردن250μlاز بافر TE یا nبدون اسکلازH₂اوه،در سرعت پایین برای 15-20 ثانیه گرد و غبار و در سرعت پایین برای 15-20 ثانیه سانتریفیوژ شود.در -20°C.

3)PCR در زمان واقعیمIXPجبران خسارت

الف) بسته خلاء را باز کنید و نوار 8 لوله را بیرون بکشیدsکه حاوی واکنش کننده است. چک گلوله در پایین لوله است (تعداد لوله ها را در صورت لزوم کاهش دهید اگرلازم است)اگر لوله های ارائه شده با ابزار شما سازگار نباشند، گلوله واکنشگر را به لوله نوری سازگار با ابزار شما منتقل کنید.

ب) لوله ها را باز کنید و کاپ (ها) را دور بیندازید (برای دستگاه های PCR زمان واقعی مناسب نیست) و مخلوط واکنش را بر روی یخ آماده کنید.

* آب بدون نوکلئاز می تواند به عنوان کنترل منفی استفاده شود.

ج)با استفاده از کلاهک (ستریپ) مناسب برای PCR در زمان واقعی، PCR را پوشش دهید.(نه ارائه شده است).

D) لوله ها را با سرعت پایین برای 10 ~ 15 ثانیه گرد و گرد کنید و با سرعت 3000 دور در دقیقه برای 20 ثانیه سانتریفیوژ کنید و آنها را در یک ابزار PCR در زمان واقعی قرار دهید.

4)تنظیمات RT-PCR

حجم واکنش را به 25μl تنظیم کنید و روش تقویت PCR را به صورت زیر تنظیم کنید.(برایO1)جو(برایO139)  فلورسنت در 60 درجه سانتیگراد، و انتخاب NONE به عنوان مرجع منفعل.

5)نتیجهAتحلیلومنتعبير