کیت تست سریع ایمنی مواد غذایی طراحی شده برای معرف‌های PCR Real Time منجمد شده برای تشخیص سریع و حساس پاتوژن‌های مواد غذایی

LyoDt^® معرف ردیابی PCR Real-Time خشک شده انجمادی برایStaphylococcus  aureus استفاده

راهنمای1. شرح

استافیلوکوکوس اورئوس، یک کوکوس گرم مثبت متعلق به جنس استافیلوکوکوس است که یک پاتوژن شایع منتقله از غذا است که قادر به تولید اگزوتوکسین هایی است که باعث مسمومیت غذایی می شوند.

برای تشخیصاستافیلوکوکوس اورئوس .مشکوک، با آزمایش مجدد تأیید کنید. NUC بسیار محافظت شده استافیلوکوکوس اورئوس این یک مسترمیکس است که حاوی تمام مواد لازم، به جز DNA الگو است و به عنوان یک آزمایش واحد در لوله های PCR از قبل توزیع شده است تا استفاده آسان شود. این محصول نیازی به زنجیره سرد برای حمل و نقل و ذخیره سازی ندارد، که به طور قابل توجهی هزینه حمل و نقل را کاهش می دهد و تلفات احتمالی ناشی از ضایعات معرف و آلودگی آئروسل را از بین می برد. 2. مشخصات و ترکیب

شماره کاتالوگ

و عمر مفید ذخیره کنید

در دمای محیط(5-30 °Cنتیجه1مشکوک، با آزمایش مجدد تأیید کنید. هنگامی که بسته بندی وکیوم باز شد، لطفاً محصولات استفاده نشده را در کیسه پلاستیکی قابل بسته شدن مجدد ارائه شده با مواد جاذب رطوبت،مشکوک، با آزمایش مجدد تأیید کنید. در کیسه فویل آلومینیومی نگهداری کنید.احتیاط:کوچک شدن گلوله معرف نشان دهنده نفوذ رطوبت به داخل لوله و مرطوب شدن معرف است. هر گونه معرف با اندازه گلوله به طور قابل توجهی کوچکتر از حد معمول باید دور ریخته شود یا قبل از استفاده با کنترل مثبت آزمایش شود 

برای آزمایش نمونه 

.    4. تجهیزات و معرف های اضافی مورد نیاز1) 

دستگاه PCR Real-Time

xtractionپیپت

چرخه3) آب عاری از نوکلئاز4) 

  5. سیستم های PCR Real-Time سازگارABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600.

6. نمونه های قابل قبولآبگوشت غنی سازی مواد غذایی، استفراغ، نمونه های اسهال و غیره.

7. روش عملیات

1) مشکوک، با آزمایش مجدد تأیید کنید.

A

ید

E

xtractionاستخراجCTاز نمونه ها با استفاده از یک کیت استخراج مناسب.توصیه می شود کهDNA

با حدود 100 میکرولیتر بافر شستشو(TEیاH2B) لوله ها را باز کرده و درپوش ها را دور بریزید (برای دستگاه های PCR Real-Time مناسب نیست) و مخلوط واکنش را روی یخ به شرح زیر آماده کنید.) در مرحله نهاییاستخراج₂₎ اسید نوکلئیک خالص شده باید بلافاصله استفاده شود یا در دمای -20 درجه سانتیگراد نگهداری شود.1تهیه کنترل مثبتکنترل مثبت را می توان قبل از آبگیری مجدد در دمای محیط نگهداری کردبافر TE یا n.

چرخهبا افزودن

250 میکرولیتربافر TE یا nuclease-free H2O, به مدت 15-20 ثانیه با سرعت کم ورتکس کنید و به مدت 15-20 ثانیه با سرعت کم سانتریفیوژ کنید. بلافاصله استفاده کنید یا ذخیره کنیددر -20°C.₂₎ PCR Real-TimeMix نتیجهمشکوک، با آزمایش مجدد تأیید کنید.

چرخهs حاوی معرف. بررسی کنید که گلوله در انتهای لوله قرار دارد(تعداد لوله ها را در صورت نیاز برش دهیداگر

لازم). اگر لوله های ارائه شده با دستگاه شما سازگار نیستند، گلوله معرف را به یک لوله نوری سازگار با دستگاه خود منتقل کنید. B) لوله ها را باز کرده و درپوش ها را دور بریزید (برای دستگاه های PCR Real-Time مناسب نیست) و مخلوط واکنش را روی یخ به شرح زیر آماده کنید.مؤلفه حجم / آزمایشمعرف خشک شده انجمادی1لوله

(2 میکرولیتر)

تنظیم RT-PCR

حجم واکنش را 25 میکرولیتر تنظیم کنید و روش تکثیر PCR را به شرح زیر تنظیم کنید. فلورسانس FAM را در 60 درجه سانتیگراد جمع آوری کنید و NONE را به عنوان مرجع غیرفعال انتخاب کنید.مرحلهدما

زمان

چرخهپیش دناتوراسیون

9 4

  الگوCTتفسیرکنترل مثبتCT≤35معرف خوب.